Trypsinization হল কোষ বিচ্ছিন্নকরণের প্রক্রিয়া যা ট্রিপসিন ব্যবহার করে, একটি প্রোটিওলাইটিক এনজাইম যা প্রোটিনকে ভেঙ্গে দেয়, যে পাত্রে অনুগত কোষগুলিকে তাদের সংষ্কৃত করা হচ্ছে তা থেকে বিচ্ছিন্ন করতে। কোষের সংস্কৃতিতে যোগ করা হলে, ট্রিপসিন প্রোটিনগুলিকে ভেঙে দেয় যা কোষগুলিকে জাহাজের সাথে লেগে থাকতে সক্ষম করে।
কেন আমরা কোষ ট্রাইপসিনাইজ করি?
Trypsinization প্রায়শই কোষকে একটি নতুন পাত্রে যাওয়ার অনুমতি দেওয়ার জন্য করা হয়, পরীক্ষা-নিরীক্ষার জন্য পর্যবেক্ষণ, বা শতকরা শতাংশ অপসারণের মাধ্যমে ফ্লাস্কে সঙ্গমের মাত্রা হ্রাস করতে কোষ।
ট্রিপসিন কোষগুলিকে আলাদা করতে কীভাবে কাজ করে?
Trypsin/EDTA হল কোষ বিচ্ছিন্ন করার একটি সম্মিলিত পদ্ধতি। ট্রিপসিন আপস্ট্রিম অ্যামিনো অ্যাসিড প্রোলাইন না হলে সি-টার্মিনালের লাইসিন বা এজিনাইনে আঠালো প্রোটিনের অ্যামাইনো অ্যাসিড কেটে কোষ-কোষ এবং কোষ-ম্যাট্রিক্স মিথস্ক্রিয়ায় আনুগত্যকারী প্রোটিনগুলিকে কেটে দেয়।
আপনি কিভাবে ট্রাইপসিনাইজড অ্যাডারেন্ট সেল পাবেন?
প্রক্রিয়া
- আকাঙ্ক্ষা অনুসারে সংস্কৃতির পাত্র থেকে মাধ্যমটি সরান এবং Ca2+ এবং Mg মুক্ত লবণের দ্রবণ দিয়ে মনোলেয়ারটি ধুয়ে ফেলুন 2+ সিরামের সমস্ত চিহ্ন মুছে ফেলতে। …
- পর্যাপ্ত পরিমাণে ট্রিপসিন বা ট্রিপসিন/ইডিটিএ দ্রবণকে কালচার ভেসেল (গুলি) মধ্যে ছড়িয়ে দিন এবং কোষের মনোলেয়ারকে সম্পূর্ণরূপে ঢেকে দিন এবং ~2 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস ইনকিউবেটরে রাখুন৷
আমি কিভাবে সেল কালচারে ট্রিপসিন অক্ষম করব?
একবার কক্ষ বিচ্ছিন্ন হয়ে গেলে ২টি ভলিউম যোগ করুনট্রিপসিনকে নিষ্ক্রিয় করার জন্য পূর্ব-উষ্ণ সম্পূর্ণ বৃদ্ধির মিডিয়ার। >95% কোষের পুনরুদ্ধার নিশ্চিত করতে সেল স্তরের পৃষ্ঠের উপর কয়েকবার পিপেটিং করে মাধ্যমটিকে আলতো করে ছড়িয়ে দিন। সিরাম মুক্ত সংস্কৃতির জন্য, সয়াবিন ট্রিপসিন ইনহিবিটর (পণ্য নং