আণবিক ওজন যত বড় হবে, কয়েল তত দীর্ঘ হবে এবং অণু তত ধীর হবে। সুতরাং, ইলেক্ট্রোফোরেসিস + SDS আণবিক ওজনের ভিত্তিতে পৃথক হয়, নেটিভ চার্জের ভিত্তিতে নয়। গুরুত্বপূর্ণ নোট: একই দৈর্ঘ্যের প্রোটিন সাধারণত জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস + SDS দ্বারা আলাদা করা যায় না।
আপনি কিভাবে একই আণবিক ওজনের প্রোটিন আলাদা করবেন?
সেন্ট্রিফিউগেশন, ইলেক্ট্রোফোরেসিস এবং ক্রোমাটোগ্রাফি প্রোটিন শোধন এবং বিশ্লেষণের জন্য সবচেয়ে সাধারণ কৌশল। সেন্ট্রিফিউগেশন প্রোটিনগুলিকে তাদের অবক্ষেপণের হারের উপর ভিত্তি করে আলাদা করে, যা তাদের ভর এবং আকৃতি দ্বারা প্রভাবিত হয়৷
কোন কৌশলগুলি চার্জের ভিত্তিতে প্রোটিনকে আলাদা করে?
আয়ন-এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা তাদের নেট চার্জের ভিত্তিতে প্রোটিনগুলিকে আলাদা করা যেতে পারে। যদি একটি প্রোটিনের pH 7-এ নেট ইতিবাচক চার্জ থাকে, তবে এটি সাধারণত কার্বক্সিলেট গ্রুপ ধারণকারী পুঁতির কলামের সাথে আবদ্ধ হবে, যেখানে নেতিবাচকভাবে চার্জযুক্ত প্রোটিন হবে না (চিত্র 4.4)।
আণবিক ওজনের উপর ভিত্তি করে পৃথক প্রোটিনের জন্য নিচের কোন কৌশলটি সবচেয়ে উপযুক্ত?
পার্টিশনের উপর ভিত্তি করে ক্রোমাটোগ্রাফি পদ্ধতিগুলি পৃথকীকরণে এবং অ্যামিনো অ্যাসিড, কার্বোহাইড্রেট এবং ফ্যাটি অ্যাসিড হিসাবে ছোট অণু সনাক্তকরণের ক্ষেত্রে খুব কার্যকর। যাইহোক, অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি (অর্থাৎ আয়ন-এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি) নিউক্লিক অ্যাসিড এবং প্রোটিন হিসাবে ম্যাক্রোমোলিকিউলসকে আলাদা করার ক্ষেত্রে বেশি কার্যকর।
কোন ধরনের কলামক্রোমাটোগ্রাফি আণবিক ওজনের ভিত্তিতে প্রোটিন আলাদা করে?
জেল পরিস্রাবণ (GF) ক্রোমাটোগ্রাফি শুধুমাত্র আণবিক আকারের ভিত্তিতে প্রোটিন আলাদা করে। বিচ্ছেদ একটি ছিদ্রযুক্ত ম্যাট্রিক্স ব্যবহার করে অর্জিত হয় যেখানে অণুগুলির, স্টেরিক কারণে, অ্যাক্সেসের বিভিন্ন ডিগ্রী রয়েছে - যেমন, ছোট অণুগুলির বেশি অ্যাক্সেস রয়েছে এবং বড় অণুগুলি ম্যাট্রিক্স থেকে বাদ দেওয়া হয়েছে৷